賽默飛分光光度計(jì)NanoDrop Eight說明書

一、儀器概述

NanoDrop Eight是賽默飛推出的新一代多通道微量分光光度計(jì)，延續(xù)了NanoDrop系列“超微量樣品檢測(cè)”的特點(diǎn)，并在檢測(cè)通量、光學(xué)系統(tǒng)和軟件功能上實(shí)現(xiàn)了全面升級(jí)。該設(shè)備能夠在無需比色皿的情況下，僅用1–2 μL樣品快速完成核酸、蛋白質(zhì)及其他生物樣品的定量與純度檢測(cè)，特別適合高通量科研實(shí)驗(yàn)室和分子生物學(xué)平臺(tái)。

主要應(yīng)用范圍：

• DNA、RNA濃度及純度分析；

• 蛋白質(zhì)濃度及溶液檢測(cè)；

• 熒光標(biāo)記物定量；

• 藥物研發(fā)、臨床檢測(cè)中的微量樣品分析；

• 高通量基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究。

二、技術(shù)原理

1. 微量檢測(cè)光學(xué)設(shè)計(jì)

NanoDrop Eight采用液體柱光路原理，利用光纖臂形成固定光程，通過樣品液滴建立光學(xué)通路。這樣無需比色皿即可檢測(cè)，顯著減少樣品消耗。

2. 自動(dòng)光程調(diào)節(jié)

系統(tǒng)能根據(jù)樣品濃度自動(dòng)選擇光程長(zhǎng)度（1.0 mm、0.2 mm、0.05 mm），保證了在極寬濃度范圍內(nèi)的線性檢測(cè)。

3. 光電檢測(cè)系統(tǒng)

光源發(fā)射紫外-可見光，樣品吸收后由硅光二極管陣列接收，轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，再通過電子電路放大、數(shù)字化處理，實(shí)現(xiàn)吸光度和濃度計(jì)算。

4. 八通道并行

NanoDrop Eight同時(shí)配備8個(gè)檢測(cè)點(diǎn)，可一次性檢測(cè)8個(gè)樣品，大幅提升實(shí)驗(yàn)效率，特別適合大規(guī)模篩查和批量分析。

三、主要性能參數(shù)

• 樣品體積：1–2 μL

• 檢測(cè)范圍：

• DNA：2–15,000 ng/μL

• 蛋白質(zhì)：0.1–200 mg/mL

• 波長(zhǎng)范圍：190–850 nm

• 光程長(zhǎng)度：0.05 mm、0.2 mm、1.0 mm（自動(dòng)切換）

• 檢測(cè)通量：8通道并行

• 重復(fù)性：標(biāo)準(zhǔn)偏差＜1%（核酸檢測(cè)）

• 數(shù)據(jù)導(dǎo)出：支持PDF、Excel、CSV格式

四、功能特點(diǎn)

1. 高通量檢測(cè)：一次性處理8個(gè)樣品，適合批量測(cè)序前質(zhì)量控制。

2. 自動(dòng)校準(zhǔn)與光程調(diào)節(jié)：無需手動(dòng)稀釋，高濃度樣品可自動(dòng)縮短光程。

3. 樣品消耗極少：僅需1 μL即可完成檢測(cè)，適合珍貴樣本分析。

4. 結(jié)果直觀：實(shí)時(shí)輸出吸收光譜、濃度及純度比值。

5. 軟件智能化：內(nèi)置核酸、蛋白質(zhì)、熒光標(biāo)記物等分析模塊，簡(jiǎn)化操作流程。

6. 通道一致性高：各檢測(cè)點(diǎn)差異小于1%，保證結(jié)果可比性。

五、操作流程

1. 開機(jī)準(zhǔn)備

• 打開電源，檢查系統(tǒng)自檢是否通過；

• 啟動(dòng)NanoDrop Eight軟件，選擇所需模式。

2. 平臺(tái)清潔

• 使用無核酸酶水或70%乙醇清潔平臺(tái)；

• 用無塵紙輕輕擦拭檢測(cè)點(diǎn)，避免殘留物。

3. 空白校正

• 滴加1–2 μL空白緩沖液；

• 點(diǎn)擊“Blank”完成基線校正；

• 系統(tǒng)自動(dòng)保存空白結(jié)果。

4. 樣品檢測(cè)

• 滴加1–2 μL樣品至平臺(tái)檢測(cè)點(diǎn)中央；

• 關(guān)閉光纖臂，點(diǎn)擊“Measure”；

• 儀器自動(dòng)完成光程選擇與數(shù)據(jù)輸出。

5. 批量檢測(cè)

• 可在8個(gè)通道分別加載樣品；

• 軟件自動(dòng)記錄各通道結(jié)果，生成批量報(bào)告。

6. 數(shù)據(jù)保存與導(dǎo)出

• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可導(dǎo)出為Excel、PDF或CSV格式；

• 支持直接上傳至實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫，便于管理。

六、注意事項(xiàng)

1. 樣品要求：避免含有沉淀或氣泡，保持均勻；

2. 加樣位置：確保液滴處于檢測(cè)點(diǎn)中央，避免偏移；

3. 平臺(tái)清潔：每次測(cè)定后立即清潔，避免殘留影響后續(xù)樣品；

4. 環(huán)境要求：保持實(shí)驗(yàn)室恒溫，避免陽光直射或強(qiáng)電磁干擾；

5. 稀釋規(guī)則：濃度過高樣品需稀釋至檢測(cè)范圍內(nèi)；

6. 空白一致性：每次實(shí)驗(yàn)均需使用相同緩沖液做空白校正。

七、維護(hù)與保養(yǎng)

1. 日常維護(hù)

• 每次實(shí)驗(yàn)后清潔檢測(cè)平臺(tái)；

• 定期運(yùn)行光路自檢；

• 建議每3–6個(gè)月進(jìn)行一次全面校準(zhǔn)。

1. 光源保養(yǎng)

• 避免頻繁開關(guān)機(jī)，延長(zhǎng)光源壽命；

• 出現(xiàn)背景噪聲增多時(shí)，檢查光源模塊。

1. 軟件更新

• 定期升級(jí)軟件版本，保持功能與數(shù)據(jù)庫最新。

1. 存儲(chǔ)與搬運(yùn)

• 儀器應(yīng)放置在穩(wěn)定平臺(tái)，避免震動(dòng)；

• 長(zhǎng)期不用時(shí)，應(yīng)覆蓋防塵罩。

八、常見問題與解決方案

1. 濃度結(jié)果異常高或低

原因：樣品濃度超出檢測(cè)范圍或空白校正不當(dāng)。
解決方法：稀釋樣品，重新做空白校正。

2. 260/280比值異常

原因：樣品含蛋白質(zhì)、酚類或鹽類污染。
解決方法：重新提取或純化樣品。

3. 樣品殘留

表現(xiàn)：后續(xù)結(jié)果偏高。
解決方法：用無核酸酶水徹底清潔平臺(tái)。

4. 通道差異大

原因：檢測(cè)平臺(tái)局部損傷或殘留。
解決方法：清潔或更換平臺(tái)。

5. 軟件無法連接設(shè)備

原因：USB接口松動(dòng)或驅(qū)動(dòng)異常。
解決方法：檢查連接并更新驅(qū)動(dòng)。

九、應(yīng)用實(shí)例

1. 基因組學(xué)：核酸定量用于測(cè)序建庫前質(zhì)控。

2. 蛋白質(zhì)組學(xué)：快速定量蛋白溶液，評(píng)估樣品純度。

3. 臨床研究：少量血清或組織裂解液樣品檢測(cè)。

4. 藥物開發(fā)：評(píng)估藥物與生物分子的結(jié)合特性。

十、總結(jié)

NanoDrop Eight以其微量樣品需求、八通道并行檢測(cè)和智能化軟件功能，為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室提供了高效、可靠的檢測(cè)平臺(tái)。通過科學(xué)的操作流程、嚴(yán)格的日常維護(hù)和合理的問題排查，用戶可以最大程度發(fā)揮儀器性能，獲得準(zhǔn)確、可重復(fù)的數(shù)據(jù)結(jié)果。

作為分子生物學(xué)和生物化學(xué)研究的重要工具，NanoDrop Eight不僅滿足常規(guī)檢測(cè)需求，還能支撐高通量實(shí)驗(yàn)和臨床研究，為科研與產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供堅(jiān)實(shí)的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。