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二手羅氏熒光定量PCR儀詳細(xì)介紹

——LightCycler 480 II 與 LightCycler 96

羅氏（Roche）在熒光定量 PCR（qPCR）領(lǐng)域具有豐富經(jīng)驗(yàn)，其 LightCycler 系列產(chǎn)品憑借穩(wěn)定的溫控性能、精確的光學(xué)檢測系統(tǒng)和易用的軟件平臺，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、醫(yī)學(xué)檢測、食品安全和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。對于預(yù)算有限或希望快速擴(kuò)充檢測能力的實(shí)驗(yàn)室來說，購買二手羅氏熒光定量 PCR 儀是一種性價(jià)比極高的選擇。

本文將詳細(xì)介紹兩款常見的二手羅氏 qPCR 機(jī)型——LightCycler 480 II（貨號：05015278001） 和 LightCycler 96（貨號：05815916001），包括其功能特點(diǎn)、適用場景、操作要點(diǎn)及使用建議。

一、LightCycler 480 II

貨號：05015278001
定位：高通量實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 系統(tǒng)
適用場景：大規(guī)模樣品檢測、科研與臨床診斷、需要多板型適配的多領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室。

1. 核心特點(diǎn)

1. 高通量能力
   可支持 96 孔、384 孔板型以及多種格式的反應(yīng)管，單次運(yùn)行可同時(shí)檢測數(shù)百個(gè)樣品，非常適合基因表達(dá)分析、大規(guī)模 SNP 分型、基因拷貝數(shù)檢測等需要高批量處理的實(shí)驗(yàn)。

2. 先進(jìn)的光學(xué)系統(tǒng)
   采用多通道光學(xué)檢測（常見為 5 色通道），可同時(shí)檢測多種熒光信號，實(shí)現(xiàn)多重 qPCR 分析。其光學(xué)均一性和靈敏度高，可有效降低孔間差異。

3. 靈活的程序設(shè)計(jì)
   用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自定義溫度梯度、熒光采集點(diǎn)和循環(huán)次數(shù)，適配 SYBR Green、TaqMan、FRET 等多種檢測化學(xué)方案。

4. 強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析功能
   配套軟件提供絕對定量、相對定量、基因分型、熔解曲線分析等多種分析模塊，可自動生成標(biāo)準(zhǔn)曲線、計(jì)算 Ct 值、分析基因表達(dá)倍數(shù)變化。

5. 溫控精準(zhǔn)
   升降溫速率高，溫度控制精度可達(dá) ±0.1℃，確保擴(kuò)增反應(yīng)的重復(fù)性和可靠性。

2. 典型應(yīng)用

• 基因表達(dá)分析：使用內(nèi)參基因歸一化，分析目標(biāo)基因的表達(dá)差異。

• SNP 分型：通過熔解曲線或探針檢測進(jìn)行基因型判定。

• 病原體檢測：適用于病毒、細(xì)菌等核酸檢測，包括臨床分子診斷。

• 轉(zhuǎn)基因檢測：可在食品或農(nóng)作物中檢測轉(zhuǎn)基因序列。

3. 操作與維護(hù)建議

1. 樣品準(zhǔn)備
   確保反應(yīng)體系配制準(zhǔn)確無誤，模板純度高，反應(yīng)管密封良好，避免蒸發(fā)。

2. 光學(xué)模塊保養(yǎng)
   定期清潔樣品槽和光學(xué)窗口，避免灰塵或樣品殘留影響熒光采集。

3. 溫控系統(tǒng)維護(hù)
   保證通風(fēng)口暢通，長期不用時(shí)應(yīng)封存防潮。

4. 軟件熟練操作
   學(xué)習(xí)使用其分析模塊，可顯著提高數(shù)據(jù)處理效率。

二、LightCycler 96

貨號：05815916001
定位：中等通量實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀
適用場景：中小型實(shí)驗(yàn)室、日常檢測、教學(xué)及常規(guī)科研任務(wù)。

1. 核心特點(diǎn)

1. 操作簡便
   采用直觀的圖形化界面，適合不同經(jīng)驗(yàn)水平的實(shí)驗(yàn)人員快速上手。
   配套軟件可直接引導(dǎo)用戶設(shè)置程序、分配樣品布局并自動生成結(jié)果。

2. 通量適中
   支持 96 孔板或常規(guī) 8 連管，既滿足日常檢測需求，又避免過高的運(yùn)行成本。

3. 多通道檢測
   一般配備 4–5 色光學(xué)通道，兼容多種熒光探針和染料，可進(jìn)行多重檢測。

4. 穩(wěn)定的溫控性能
   溫度均一性高，孔間差異低于 ±0.2℃，確保重復(fù)性。

5. 網(wǎng)絡(luò)化管理
   支持?jǐn)?shù)據(jù)聯(lián)網(wǎng)傳輸和遠(yuǎn)程訪問，方便實(shí)驗(yàn)室信息化管理和多點(diǎn)協(xié)作。

2. 典型應(yīng)用

• 常規(guī)基因定量分析：如檢測目標(biāo)基因在不同處理?xiàng)l件下的表達(dá)變化。

• 病原體快速篩查：在食品檢測、臨床快速檢測中應(yīng)用廣泛。

• 教學(xué)與培訓(xùn)：界面友好，便于在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中演示 qPCR 原理與操作流程。

3. 操作與維護(hù)建議

1. 快速上手
   新手可使用默認(rèn)程序模板，根據(jù)試劑說明調(diào)整退火溫度和循環(huán)次數(shù)。

2. 數(shù)據(jù)安全
   建議定期備份數(shù)據(jù)文件，并妥善保存板布局文件以便重復(fù)分析。

3. 維護(hù)習(xí)慣
   實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)清潔樣品區(qū)，避免長時(shí)間殘留液體或灰塵。

三、二手設(shè)備選購與使用注意事項(xiàng)

1. 選購前檢測

• 檢查溫控均一性、光學(xué)通道功能是否正常。

• 查看運(yùn)行記錄，確認(rèn)加熱模塊和光源未接近壽命終點(diǎn)。

• 核對軟件授權(quán)是否完整。

2. 耗材與兼容性
   購買前確認(rèn)可兼容的反應(yīng)板、試劑品牌及耗材規(guī)格，以免后續(xù)使用受限。

3. 售后與配件
   優(yōu)先選擇有維修保障或配件供應(yīng)的渠道，減少維護(hù)風(fēng)險(xiǎn)。

四、兩款型號的對比

五、使用優(yōu)化建議

1. 程序優(yōu)化：針對不同實(shí)驗(yàn)（如基因表達(dá)、病原體檢測、SNP分型）建立獨(dú)立的模板程序。

2. 溫控梯度實(shí)驗(yàn)：在新項(xiàng)目中先做退火溫度優(yōu)化，提高特異性和擴(kuò)增效率。

3. 定期校準(zhǔn)：建議每半年或一年進(jìn)行一次光學(xué)和溫控系統(tǒng)的校準(zhǔn)。

4. 數(shù)據(jù)管理：二手設(shè)備可能無長期質(zhì)保，建議每次運(yùn)行后立即保存并備份數(shù)據(jù)，防止軟件或硬盤故障造成丟失。