在分子生物學、臨床研究與精準醫(yī)療逐漸深入發(fā)展的今天,實時熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為核酸檢測、表達分析及基因變異研究的關(guān)鍵方法。Applied Biosystems 7500 系列,作為賽默飛旗下廣受歡迎的實時熒光定量PCR平臺,憑借其高穩(wěn)定性、良好通量、靈活的軟件平臺和出色的數(shù)據(jù)一致性,被全球眾多實驗室廣泛采用。
7500系列包括兩種機型:標準版7500與7500 Fast型,分別面向常規(guī)通量與快速檢測需求,適用于多種樣本類型及實驗場景,兼容多種熒光探針與反應體系,是研究與診斷之間的重要橋梁。
Applied Biosystems 7500 系列基于傳統(tǒng)96孔反應板設(shè)計,支持標準0.2 mL孔板或八聯(lián)管。整機設(shè)計緊湊,集成光學檢測與溫控模塊,操作界面直觀,硬件結(jié)構(gòu)設(shè)計合理。
96孔熱循環(huán)模塊(標準或Fast)
精密溫控系統(tǒng)(Peltier固態(tài)冷卻)
五通道光學檢測系統(tǒng)
Windows操作平臺連接的軟件系統(tǒng)
通用PCR塑料耗材適配架
外接PC與軟件控制界面
通過結(jié)構(gòu)模塊化設(shè)計,設(shè)備實現(xiàn)了快速升降溫、精準熒光檢測與靈活數(shù)據(jù)分析的高度整合。
升溫速率為2.5°C/秒;
完整反應周期約需2小時;
適合對速度要求不高但對數(shù)據(jù)質(zhì)量要求較高的應用;
多用于常規(guī)基因表達、微生物檢測、SNP分型等科研任務。
升溫速率提升至5°C/秒;
全程反應時間可縮短至30-40分鐘;
適合時間敏感實驗如臨床樣本快速篩查、病原快速診斷等;
支持Fast反應耗材與Fast反應試劑,需專門適配。
兩款設(shè)備在光學系統(tǒng)、數(shù)據(jù)分析能力和軟件平臺方面保持一致,均支持多重檢測及標準定量分析。
7500系列均配備5通道光學檢測系統(tǒng),采用獨立激發(fā)濾光片與發(fā)射濾光片組合,分別對應多種常見熒光染料:
支持FAM、VIC、SYBR Green、ROX、TAMRA、NED、Cy5等染料;
通道之間無交叉干擾,適合多重熒光反應;
光源為高亮度氙燈,配合高靈敏CCD攝像頭捕捉信號;
每個通道設(shè)定獨立校準值,確保反應線性范圍廣(10個數(shù)量級以上);
最低檢測靈敏度可達1-10個拷貝/μL。
系統(tǒng)經(jīng)過嚴格的工廠預校準,保證設(shè)備到達即用,無需額外光路調(diào)整。
高精度溫控是PCR反應成敗的關(guān)鍵。7500系列的熱循環(huán)模塊采用高導熱Peltier熱電元件,實現(xiàn)快速升降溫與精準溫度控制:
溫度精度 ±0.25°C;
熱蓋自動壓力調(diào)節(jié),適配不同耗材;
支持梯度設(shè)計,便于引物退火溫度優(yōu)化;
均一性良好,邊緣效應極低,實驗重復性高。
Fast型號更在標準基礎(chǔ)上優(yōu)化加熱算法與模塊材料,提高整體實驗通量與響應速度。
賽默飛為7500系列配套開發(fā)了功能全面的分析軟件(7500 System SDS Software),適用于Windows環(huán)境,支持多種實驗模式與分析方式:
實時數(shù)據(jù)監(jiān)控:可實時查看熒光曲線、熔解曲線與擴增效率;
Ct值分析:系統(tǒng)自動設(shè)定閾值或允許手動調(diào)整;
標準曲線功能:支持絕對定量、拷貝數(shù)分析;
相對定量分析:ΔCt、ΔΔCt方法一鍵完成;
SNP分型與HRM分析:支持TaqMan MGB探針及高分辨熔解曲線模塊(升級后支持);
圖表報告導出:可生成PDF、Excel格式報告,便于歸檔與發(fā)表。
軟件支持模板文件建立與實驗復制,減少重復設(shè)定操作時間,提高數(shù)據(jù)一致性。
7500 / 7500 Fast 系統(tǒng)支持多種分子實驗,尤其適合中等通量下對結(jié)果穩(wěn)定性要求較高的任務:
通過SYBR Green法或TaqMan探針體系實現(xiàn)目標基因表達量變化分析,適合研究藥物調(diào)控、應激響應與轉(zhuǎn)錄機制。
快速識別細菌、病毒或真菌核酸序列,特別適用于病原體快速篩查、傳染病流行追蹤及臨床預警。
配合商業(yè)探針或自定義引物,可實現(xiàn)EGFR、KRAS、BRAF等突變熱點位點分析,為個性化治療提供依據(jù)。
進行CNV(Copy Number Variation)分析、SNP分型與基因型篩查,適用于遺傳疾病、胚胎檢測及家族病譜分析。
對轉(zhuǎn)基因作物、食品添加劑、環(huán)境樣品中生物污染進行靈敏檢測,是食品安全及生態(tài)監(jiān)測領(lǐng)域的得力工具。
保持20-25bp長度,GC含量在45%-60%;
回避二聚體與發(fā)夾結(jié)構(gòu);
探針置于引物之間,避免重疊;
建議使用TaqMan或MGB修飾探針以提高特異性。
使用原廠推薦的0.2 mL光學板或8聯(lián)管;
使用ROX作為被動參比染料(系統(tǒng)自動校正);
建議使用Fast試劑體系時選擇Fast熱循環(huán)程序;
步驟 | 溫度 | 時間 |
---|---|---|
初始變性 | 95°C | 10分鐘 |
變性 | 95°C | 15秒 |
退火/延伸 | 60°C | 60秒 |
循環(huán)次數(shù) | — | 40次 |
Fast反應條件下退火/延伸可縮短至30秒以內(nèi)。
設(shè)定NTC對照、陽性對照和標準曲線;
使用融解曲線分析檢測非特異擴增;
引入?yún)⒖蓟蜻M行標準化;
檢查擴增效率是否在90%-110%范圍內(nèi)。
7500系列設(shè)備在全球?qū)嶒炇抑薪?jīng)受多年考驗,以高穩(wěn)定性、可重復性與維護友好著稱:
每臺設(shè)備出廠前通過嚴格光學與溫控測試;
具備長時間運行穩(wěn)定性,適合連續(xù)樣本處理;
提供完善的本地化技術(shù)支持、校準服務與用戶培訓;
軟件定期更新,確保兼容性與數(shù)據(jù)安全;
可選購校準套件、探針試劑及Fast模塊升級組件。
Applied Biosystems 7500 / 7500 Fast 實時熒光定量PCR系統(tǒng)憑借其高質(zhì)量的光學模塊、穩(wěn)定的熱循環(huán)系統(tǒng)、兼容多種應用需求的軟件平臺以及良好的用戶體驗,成為中高通量實驗室及研究單位理想的qPCR解決方案。
無論是在基因功能研究、臨床分子檢測,還是在環(huán)境與食品安全領(lǐng)域,7500系列以其靈活性和可靠性為基礎(chǔ)研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學提供了堅實保障。其在科研與臨床之間的橋梁作用,也使其成為高校、醫(yī)院與生物技術(shù)公司信賴的核心平臺之一。
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