QuantStudio 5 96孔實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高性能分子診斷和科研平臺,專為中高通量實(shí)驗(yàn)需求設(shè)計(jì),集成了精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)、靈敏的熒光檢測模塊和智能化數(shù)據(jù)處理功能,廣泛適用于生命科學(xué)研究、臨床檢驗(yàn)、生物制藥、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)等領(lǐng)域。
作為QuantStudio系列的重要成員,QS5 96孔型號在保持儀器緊湊設(shè)計(jì)與操作友好性的同時(shí),兼顧高通量與高靈敏度,尤其適合對樣本數(shù)量要求較高的科研課題或多靶標(biāo)檢測項(xiàng)目。
QS5 96孔儀器采用經(jīng)典的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-Time qPCR)技術(shù),即在PCR反應(yīng)過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號的變化,進(jìn)而推算目標(biāo)DNA或RNA分子的初始數(shù)量。
其主要原理流程如下:
擴(kuò)增反應(yīng):使用特異性引物引導(dǎo)目標(biāo)序列在熱循環(huán)中被擴(kuò)增。
熒光信號釋放:通過結(jié)合熒光染料(如SYBR Green)或探針(如TaqMan)實(shí)現(xiàn)熒光信號與DNA擴(kuò)增同步上升。
實(shí)時(shí)監(jiān)測:儀器內(nèi)部光學(xué)系統(tǒng)每個(gè)循環(huán)采集熒光信號強(qiáng)度,生成擴(kuò)增曲線。
定量分析:通過Ct值(閾值循環(huán)數(shù))與標(biāo)準(zhǔn)曲線模型或ΔΔCt法進(jìn)行絕對或相對定量。
QS5的算法支持精確檢測極低表達(dá)的核酸分子,并可用于多重分析,實(shí)現(xiàn)一孔多靶的檢測策略。
孔數(shù)配置:標(biāo)準(zhǔn)96孔反應(yīng)模塊,兼容0.1 mL光學(xué)PCR管或板。
加熱均一性:整板溫度差控制在±0.5°C以內(nèi)。
升/降溫速率:最高升溫4.5°C/s,降溫4.0°C/s,支持快速PCR程序。
熱蓋功能:具備壓力調(diào)節(jié)和自動(dòng)開啟/關(guān)閉功能,避免反應(yīng)液蒸發(fā)。
檢測通道:最多5通道(型號可選),支持多種熒光染料,如FAM、VIC、ROX、Cy5等。
檢測方式:使用高靈敏度CCD攝像頭,進(jìn)行全孔掃描,無需移動(dòng)部件。
熒光采集靈敏度:可檢測低至10個(gè)拷貝的目標(biāo)序列,適用于微量樣本。
濾光片配置:多通道獨(dú)立濾光片,避免信號串?dāng)_。
觸控屏操作:內(nèi)置10.1英寸彩色液晶屏,支持圖形化操作。
遠(yuǎn)程控制:支持以太網(wǎng)/WiFi連接,允許多用戶遠(yuǎn)程創(chuàng)建實(shí)驗(yàn)和下載結(jié)果。
數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式:可導(dǎo)出為Excel、PDF、XML等格式,便于統(tǒng)計(jì)和記錄。
QuantStudio 5配套的軟件系統(tǒng)為Design and Analysis Software,具備以下功能:
標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建:自動(dòng)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算擴(kuò)增效率。
多重定量分析:支持多個(gè)靶標(biāo)在同一孔內(nèi)進(jìn)行定量。
相對表達(dá)分析(ΔΔCt法):評估不同處理組基因表達(dá)差異。
基因分型分析:識別SNP、INDEL等遺傳變異。
熔解曲線分析:識別非特異擴(kuò)增或引物二聚體。
自動(dòng)質(zhì)控提示:提醒操作錯(cuò)誤、樣本異?;蚍磻?yīng)異常等狀況。
軟件界面直觀,適合初學(xué)者使用,同時(shí)也支持高級用戶自定義模板、腳本等高級功能。
QS5 96孔儀器的操作被設(shè)計(jì)為五步標(biāo)準(zhǔn)流程,大大降低了實(shí)驗(yàn)門檻:
準(zhǔn)備反應(yīng)體系:按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)配置體系,分裝于96孔PCR板中。
選擇方法模板:從儀器內(nèi)置模板庫選擇匹配實(shí)驗(yàn)方案,或自定義設(shè)定循環(huán)參數(shù)。
啟動(dòng)運(yùn)行程序:放入樣品,設(shè)置熒光通道,點(diǎn)擊“運(yùn)行”啟動(dòng)擴(kuò)增。
實(shí)時(shí)監(jiān)測進(jìn)程:用戶可在過程中查看擴(kuò)增曲線、熒光強(qiáng)度等信息。
輸出與分析結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,可直接生成圖表、熱圖或?qū)С鲈紨?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
整個(gè)流程約30秒內(nèi)可完成設(shè)置,操作簡潔直觀,極大提升工作效率。
QuantStudio 5 96孔qPCR系統(tǒng)具備以下突出的技術(shù)優(yōu)勢:
允許根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇2、4或5通道配置,覆蓋絕大多數(shù)熒光標(biāo)記需求。
標(biāo)準(zhǔn)96孔布局支持中大樣本量實(shí)驗(yàn),尤其適合藥物篩選、突變檢測、基因分型等多樣品需求。
溫控均一性與熒光采集靈敏度雙重優(yōu)化,確保Ct值穩(wěn)定,重復(fù)性好,特別適合差異表達(dá)分析。
支持多用戶登錄,歷史實(shí)驗(yàn)記錄管理方便。云端協(xié)作功能幫助跨區(qū)域研究團(tuán)隊(duì)統(tǒng)一數(shù)據(jù)平臺。
儀器兼容主流熒光染料和探針系統(tǒng),支持第三方耗材使用,降低實(shí)驗(yàn)成本。
QS5 96孔系統(tǒng)已在多個(gè)行業(yè)中實(shí)現(xiàn)成熟應(yīng)用,包括但不限于:
病毒載量檢測(如HIV、HBV、HCV、新冠)
遺傳病基因突變分析
腫瘤分子標(biāo)志物篩查
個(gè)體化用藥指導(dǎo)(如EGFR、KRAS突變)
基因表達(dá)分析(組織特異性、時(shí)間特異性)
轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機(jī)制研究
表觀遺傳學(xué)(如miRNA、lncRNA)
基因編輯效率評估
藥物對靶基因表達(dá)的影響評估
生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證
細(xì)胞系篩選與穩(wěn)定性檢測
微生物污染篩查
轉(zhuǎn)基因成分檢測
農(nóng)殘DNA污染分析
為確保儀器長期穩(wěn)定運(yùn)行,用戶應(yīng)注意以下操作細(xì)節(jié):
定期進(jìn)行溫控系統(tǒng)校準(zhǔn),確保擴(kuò)增曲線穩(wěn)定。
清潔光學(xué)檢測區(qū)域,防止熒光干擾。
使用推薦耗材,避免因兼容性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
軟件升級保持最新版本,保障算法與通道兼容性。
存儲板時(shí)使用光學(xué)密封膜避免蒸發(fā)或污染。
此外,建議建立實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP),并定期進(jìn)行質(zhì)控實(shí)驗(yàn),監(jiān)測系統(tǒng)表現(xiàn)。
隨著分子診斷和精準(zhǔn)醫(yī)療的發(fā)展,對實(shí)時(shí)熒光PCR系統(tǒng)提出更高要求。QuantStudio 5 96孔作為當(dāng)前技術(shù)成熟平臺,仍具備以下潛在拓展能力:
聯(lián)用自動(dòng)化加樣系統(tǒng):實(shí)現(xiàn)高通量無人化操作。
整合LIMS系統(tǒng):支持實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng),提升數(shù)據(jù)可追溯性。
集成數(shù)字PCR功能:未來可升級為分區(qū)定量模塊,提升檢測分辨率。
兼容多重探針擴(kuò)展:進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)一孔多靶標(biāo)的臨床級別檢測。
這使得QS5 96孔不僅是一臺儀器,更是一個(gè)可成長的實(shí)驗(yàn)平臺。
Thermo Fisher QuantStudio 5 96孔實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其精準(zhǔn)、快速、通量適中、操作智能化等優(yōu)勢,已經(jīng)成為眾多實(shí)驗(yàn)室日常qPCR分析的首選工具。它不僅滿足當(dāng)前的科研與檢測需求,也具備向高通量、自動(dòng)化、臨床級別擴(kuò)展的潛力。
不論是用于科研數(shù)據(jù)積累,還是臨床檢測方案實(shí)施,QS5 96孔都能提供可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)與高效的操作體驗(yàn),是現(xiàn)代分子實(shí)驗(yàn)室不可或缺的主力設(shè)備之一。
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