賽默飛洗板機 Wellwash 1x8 校準方法詳解

一、設(shè)備概述

賽默飛 Wellwash 1x8 洗板機是一款面向常規(guī) ELISA 實驗和 96 孔微孔板清洗任務(wù)的自動化設(shè)備。它采用 單排 8 通道噴頭，能夠逐行完成清洗任務(wù)。相較于 1x12 型號，1x8 更適合精細化清洗，液體使用量較低，尤其適用于實驗量中等、對操作靈活度要求較高的實驗室。

校準是保證 Wellwash 1x8 穩(wěn)定運行的前提。只有通過科學(xué)的校準方法，才能確保噴液均勻、吸液徹底、針頭高度精準，從而避免因殘液過多、洗滌不均而影響 ELISA 信號讀數(shù)。

二、校準的目的與意義

1. 確保液體分布均一

• 保證每一行 8 個孔內(nèi)液體體積一致，避免邊緣效應(yīng)。

2. 降低背景信號

• 通過校準，殘液量減少，未結(jié)合物被完全去除，從而減少假陽性和背景噪音。

3. 延長設(shè)備壽命

• 合理的參數(shù)設(shè)定減少管路堵塞、針頭損耗，提高使用壽命。

4. 提升實驗可重復(fù)性

• 在不同批次、不同人員操作下，仍能獲得一致的清洗效果。

三、校準前的準備工作

1. 環(huán)境與設(shè)備檢查

• 確保設(shè)備放置平穩(wěn)，避免震動。

• 室內(nèi)溫度保持在 15-30℃，相對濕度低于 70%。

• 電源電壓穩(wěn)定，插座接地良好。

2. 液體與耗材準備

• 使用新鮮 PBS、TBS 或 PBS-T 緩沖液作為校準用清洗液。

• 配備標準 96 孔微孔板，建議使用透明板，便于觀察殘液。

• 準備少量帶色染液（如稀釋甲基藍），用于檢測清洗均一性。

3. 管路與針頭檢查

• 確認進液瓶中液體充足，廢液瓶為空。

• 檢查進液管、廢液管無漏液。

• 確認 8 個噴針排列整齊，無彎曲或堵塞。

四、核心校準步驟

1. 開機自檢與液路排氣

• 打開電源，等待系統(tǒng)完成自檢。

• 運行“Prime”功能，將清洗液充滿管路，排除空氣泡。

• 觀察 8 個噴針是否同時均勻出液。若有不暢，需進一步清洗或疏通。

2. 進液體積校準

• 設(shè)定初始進液體積（如 300 μL/孔）。

• 將程序運行一次，觀察每孔液體高度。

• 若液體不足，可逐步增加進液量至 350 μL；若溢出，則調(diào)小體積或減慢注液速度。

3. 吸液針高度校準

• 將針頭調(diào)整至接近孔底但不接觸，通常為 0.1-0.2 mm 間隙。

• 運行程序，檢查殘液：

• 若殘液明顯，則說明針頭過高；

• 若針頭劃傷孔底，則說明過低。

• 最佳狀態(tài)是孔底僅留一層極薄水膜。

4. 吸液延時與泵速調(diào)節(jié)

• 在程序中增加 1-2 秒吸液延時，確保液滴完全被抽出。

• 對于高粘度液體，可適度減緩泵速，避免吸液不徹底。

5. 浸泡時間校準

• 對于標準 ELISA，浸泡 20-30 秒即可。

• 若非特異性結(jié)合較強，可延長至 60 秒。

• 若細胞附著實驗，應(yīng)減少浸泡時間，避免目標細胞脫落。

6. 清洗次數(shù)優(yōu)化

• 默認 3 次清洗足以滿足大部分實驗。

• 對于背景高的實驗，增加至 5 次；對于敏感實驗，避免過度清洗以免損傷結(jié)合物。

7. 均一性測試

• 在校準過程中，使用染色液檢測清洗效果：

• 將染液加入孔內(nèi)，運行清洗程序；

• 觀察殘留顏色是否一致；

• 若邊緣孔與中間孔差異較大，需檢查板托水平或針頭對齊度。

五、功能驗證與調(diào)試實驗

1. 空板驗證

• 使用空板運行一次，確認噴液和吸液動作流暢。

2. 殘液量測定

• 清洗后稱量微孔板，計算殘液量，判斷吸液是否充分。

3. 重復(fù)性實驗

• 連續(xù)運行同一程序 5 次，檢查不同板間清洗效果是否一致。

4. 儀器內(nèi)部檢查

• 運行完成后，檢查泵體和管路有無異常噪音或震動。

六、常見問題與解決方案

1. 噴液不均

• 原因：針頭堵塞或有氣泡。

• 解決：用超聲波清洗針頭或重新排氣。

2. 吸液不徹底

• 原因：針頭過高、泵壓不足或殘液滯留。

• 解決：調(diào)低針頭、增加吸液延時、檢查泵壓。

3. 清洗效果不一致

• 原因：板托不平或針頭排列偏斜。

• 解決：調(diào)整板托水平，重新安裝針頭。

4. 背景偏高

• 原因：洗滌不充分或緩沖液不合適。

• 解決：增加清洗次數(shù)或更換緩沖液。

5. 管路滲漏

• 原因：接口松動或老化。

• 解決：重新安裝或更換管路。

七、維護與優(yōu)化

1. 每日維護

• 校準完成后，運行去離子水清洗程序。

• 倒空廢液瓶并沖洗干凈。

2. 定期維護

• 每周檢查針頭是否有鹽析，必要時清洗。

• 每月檢查泵體和管路密封性，替換老化部件。

3. 長期停機保護

• 用純水沖洗管路，再注入 70% 酒精保存。

• 覆蓋防塵罩，保持干燥環(huán)境。

4. 建立 SOP

• 將校準步驟記錄為實驗室操作規(guī)程，確保不同人員操作一致。

八、應(yīng)用經(jīng)驗總結(jié)

1. ELISA 實驗

• 推薦 PBS-T 緩沖液，校準進液體積 300 μL，吸液延時 2 秒，清洗 4 次。

2. 細胞相關(guān)實驗

• 避免高壓沖洗，進液速度設(shè)為中等，針頭高度略高，保護細胞層。

3. 大批量樣本檢測

• 建議批量校準參數(shù)并保存為固定程序，減少重復(fù)設(shè)置。

4. 多人員操作實驗室

• 應(yīng)建立電子記錄表格，追蹤每次校準參數(shù)和結(jié)果，方便追溯。

九、總結(jié)

賽默飛 Wellwash 1x8 洗板機的校準方法涉及 液路排氣、進液體積調(diào)節(jié)、針頭高度設(shè)定、吸液延時控制、浸泡時間與清洗次數(shù)優(yōu)化 等多個環(huán)節(jié)?？茖W(xué)的校準不僅能顯著降低背景噪音，還能提升實驗重復(fù)性和準確性，同時延長設(shè)備壽命。通過建立標準化操作規(guī)程，結(jié)合日常維護與經(jīng)驗積累，實驗室能夠穩(wěn)定發(fā)揮 Wellwash 1x8 的性能，為 ELISA 和相關(guān)檢測提供可靠保障。